赖氨大黄酸与大黄酸对大鼠胆汁淤积性肝纤维化

肝纤维化是指细胞外基质的合成和降解的不平衡导致肝脏纤维结缔组织过度沉积，是多种原因引起的慢性肝病向肝硬化发展所经历共有的病理改变和必经途径[1]。目前研究表明，进行抗纤维化治疗可以显著降低肝纤维化程度，可以逆转肝纤维化[2]。大黄酸（Rhein）是一种蒽醌类化合物，是大黄、何首乌、虎杖等传统中药的主要有效成分之一。研究表明大黄酸除具有抑制肿瘤细胞增殖[3-4]、抗炎[5]、抗菌及调节肾功能等功效，还具有保肝和抗肝纤维化的药理作用[6]，然而，水溶性较差的大黄酸，限制其进一步应用，为改善其水溶性，以赖氨酸作为溶剂对大黄酸的结构进行改造获得水溶性较好的赖氨大黄酸。本研究采用胆总管结扎法建立大鼠肝纤维化模型，形成人为的肝外胆道梗阻，胆汁排泄障碍导致以胶原为主的细胞外基质成分合成增多，过多沉积在肝内窦周间隙形成肝纤维化[7]。此模型与CCL4和DMN等药物所致化学损伤动物模型[8]相比有显着差异，成模时间短且肝实质细胞无明显坏死[9]，对抗肝纤维化研究中具有重要意义。本研究旨在比较RHL和大黄酸防治BDL肝纤维化的作用。 1 材料与方法 1.1 动物、主要试剂和仪器：由天津实验动物研究所提供SD大鼠，雄性，在22 ℃恒温、65%~70%的相对湿度环境中饲养适应2 d后进行实验。赖氨大黄酸自制，纯度98%，相对分子质量：430，室温储存； ALT、AST、TBA、TBIL试剂盒，HE染色试剂盒，Masson 染色试剂盒，羟脯氨酸试剂盒购，RIPA裂解液，BCA蛋白浓度测定试剂盒，α-SMA抗体，GAPDH一抗抗体、羊抗兔二抗和羊抗小鼠二抗，免疫组化试剂盒；F6/10-8G型FLUKO 超细匀浆机，5810R低温高速离心机，Gemini EM荧光读板机，BX63全自动显微镜扫描系统，电泳转印系统、凝胶成像系统，Rayto chemray 240全自动生化分析仪。